細胞介紹

B16-F1細胞是B16-F0細胞的亞系，源自黑色素瘤C57BL/6J荷瘤小鼠的皮膚；B16-F1細胞可產生黑色素。

基本信息

細胞別稱：B16/F1; B16 F1; B16F1

細胞來源：皮膚

細胞形態：上皮細胞樣　

生長特性：貼壁生長

安全等級：BSL1

包裝規格：T25瓶或者1mL凍存管包裝

倍增時間：2~3天

傳代比例：1:3

保藏機構：ATCC;CRL-6323;BCRC;60030;
CCTCC;GDC0039

培養保存

培養體系：DMEM +10%FBS

培養條件：
氣相:空氣,95%;CO2,5%;溫度:37℃

凍存條件：
基礎培養基+8%DMSO +20%FBS，液氮保存

傳代步驟

如果細胞密度達80%-90%，即可進行傳代培養。

1. 棄去培養上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次；
2. 加2ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）於培養瓶中，置於37℃培養箱中消化1-2分鐘，然後在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓並脫落，迅速拿回操作台，輕敲幾下培養瓶後加少量培養基終止消化；
3. 按6-8ml/瓶補加培養基，輕輕打勻後吸出，在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養液後吹勻；
4. 收到細胞後首次傳代推薦將細胞懸液按1：2的比例分到新的含6ml培養基的新皿中或者瓶中，建議凍存一支備用，後續傳代根據實際情況按1:2到1:4的比例進行。

凍存步驟

1. 細胞凍存時，棄去培養基後，PBS清洗一遍後加入1ml胰酶，細胞變圓脫落後，加入1ml含血清的培養基終止消化，可使用血球計數板計數；
2. 4min 1000rpm 離心去掉上清。加1ml血清重懸細胞，根據細胞數量加入血清和DMSO，輕輕混勻，DMSO終濃度為10%，細胞密度不低於1x10(6)/ml，每支凍存管凍存1ml細胞懸液，注意凍存管做好標識；
3. 將凍存管置於程序降溫盒中，放入-80度冰箱，至少2個小時以後轉入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞用途

僅供科研使用。

質檢結果

支原體、細菌、酵母和真菌檢測為陰性。

注意事項

1.收到常溫細胞後，請檢查產品包裝狀況，若發現破損、溢出及污染，請及時聯繫我們。
2.先不打開培養瓶蓋，用75%酒精處理培養瓶表面，如果是貼壁細胞， 請在培養箱中靜置2-3小時（根據細胞密度狀況決定）用來穩定細胞狀態。如果是懸浮細胞則不需要靜置，直接按照懸浮細胞步驟操作。