實驗操作是引起動物疼痛和痛苦的主要因素，很難為這些大量不同的操作列出一個明確的清單，而且各種操作引起疼痛或痛苦的嚴重程度明顯各不相同。下表列出的只是一個大概的總結。
值得注意的是，這些分級都是基於由專業人員的操作會導致的疼痛和痛苦，而非專業人員的操作引起動物疼痛和痛苦大概遠不如此。
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疼痛和痛苦分類 |
臨床症狀 |
實驗操作 |
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A. 輕微不適和痛苦 |
無不良反應 |
1. 注射（靜脈，皮下，肌肉，腹腔） 2. 口服給藥 3. 全身的麻醉 4. 被允許的安樂死方法 5. 嚙齒類動物剪尾和標識 |
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B. 短時間的輕微應激或疼痛 |
動物應無自殘、食欲不振、脫水和激動現象，但休息或睡眠時間增加，喊叫次數增加，攻擊性/防禦性行為增加，或社會化行為退縮及自我孤立。 |
1. 短時間禁食或禁水 2. 短時間應激 3. 麻醉中插管或植入導管 4. 小型外科手術（如淺表性腫瘤植入、淺表淋巴結切除術、大腦內植入術、輸精管結紮術等） 5. 多種不同抗原注射 6. 暴露於不致命性的藥物或化學物下，未對動物造成顯著的物理性變化 |
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C. 中等至嚴重程度的應激或不適 |
1.行為異常 2.不梳理毛髮 3.脫水 4.不正常的喊叫 5.長時間的食欲不振 6.循環系統紊亂 7.極度倦怠或不願意移動 8.中等至嚴重程度的局部或全身性感染 |
1. 在全身性麻醉下進行重大手術（如剖腹產手術、甲狀腺切除術、睪丸切除術、剖腹產、胚胎移植手術、垂體/胸腺切除術等） 2. 長時間的物理性保定 3. 誘導行為上的應激，如：剝奪母親照顧、侵略性行為、天敵威脅。 4. 誘導解剖學或物理學異常造成的疼痛或應激 5. 輻射性病痛 6. 藥物或化學損害動物的生理系統 |
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D.對清醒、未麻醉動物造成劇烈疼痛且接近或超過疼痛極限 |
1.自我孤立 2.社會化行為嚴重退縮 3.休息或睡眠時間增加 4.嚴重的食欲不振 5.動物外表顯著改變 6.極度倦怠 7.垂死 |
1.暴露於有害物 2.藥物或化學物嚴重損害動物生理系統造成動物死亡、劇烈疼痛或極度痛苦 3.未麻醉情形下使用麻痹或肌肉鬆弛劑 4.燒燙傷或創傷性疼痛和痛苦 5.未經允許的安樂死方法 6.任何會造成接近疼痛閾值且無止痛劑解除該疼痛的操作步驟 7. 術後使用鎮痛藥物亦有疼痛的重大手術（如腹腔探查和器官切除術、胸廓切開術、異種器官移植術、脊椎手術、骨科手術等） |
信息來源：浙江大學實驗動物中心